ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ И ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ТЕРМОВОЗГОННЫХ ПРЕПАРАТОВ «ТАМБЕЙ» И «ВИМАЛ»

Категория: Ветеринария и зоотехния.

В условиях промышленного содержания и разведения сельскохозяйственных животных происходит плохо контролируемое развитие и распространение микрофлоры. Это приводит к увеличению микробной нагрузки на организм животных, что требует дезинфекции помещений для профилактики различных заболеваний, в том числе верхних дыхательных путей [1]. Для дезинфекции помещений чаще всего применяют препараты, которые разрешено использовать только в отсутствие животных: формальдегид, йодистый алюминий, 2–фенилфенол и др. [2, 3, 4]. Для этих же целей можно применять ветеринарные препараты в виде термовозгонных шашек, предназначенные для лечения и профилактики заболеваний, содержащие такие действующие вещества, как йод («Диксам», «Вимал», «ГААС», «Фумийод») [5, 6, 7] и пихтовое масло («Тамбей») [8]. Они позволяют как лечить, так и проводить профилактику заболеваний животных, снижая микробную и грибковую обсемененность помещений, что является ценным свойством этих препаратов.

В работе представлены результаты исследований противомикробного и фунгицидного действия препаратов «Вимал» и «Тамбей», проводившихся в лабораторных условиях и в помещении для содержания сельскохозяйственных животных функционирующего хозяйства.

Материалы и методы исследований

Термовозгонные шашки. В ра­­боте представлены результаты исследования противомикробного и фунгицидного действия препаратов «Вимал» (действующее вещество – кристаллический йод, содержание составляет 20% от массы шашки) и «Тамбей» (действующее вещество – пихтовое масло, содержание составляет 25%), производства ООО «Санветпрепарат плюс» (г. Пермь). Термовозгонная шашка «Вимал» исследовалась в одной концентрации, термовозгонная шашка «Тамбей» – в нескольких.

Оценка общей микробной обсемененности воздуха осуществлялась в затравочной камере и в помещении для содержания телят.

Оценка антимикробной активности в затравочной камере исследуемых препаратов проводилась седиментационным методом Коха, в качестве среды использовался МПА, объем камеры 0,26 м3. На дно камеры устанавливались чашки из расчета – 10 единиц на камеру. Препараты изучали в концентрациях: «Тамбей» – 1,0 и 2,0 мг/л; «Вимал» – 0,02 мг/л в пересчете на йод. Время экспозиции составляло 30 мин. Отбор проб проводили до обработки (контроль) и спустя 30 мин после обработки препаратами. Чаш­ки оставляли открытыми в течение 10 мин. Инкубацию проводили в термостате при температуре 37 °С в течение 48 ч, после чего подсчитывали количество выросших колоний (КОЕ). Количество микрофлоры в воздухе рассчитывали по формуле В. Л. Омелянского [9].

Оценка антимикробной активности препаратов в помещении для содержания телят проводилась по такой же схеме, антимикробная активность изучалась с использованием седиментационного метода Коха. Препараты брали в концентрациях: «Тамбей» – 1 мг/л и «Вимал» – 0,02 мг/л в пересчете на йод. Время экспозиции составляло 30 и 120 мин. Отбор проб проводили до обработки (контроль) и спустя 30 и 120 мин после обработки препаратами.

Оценка общей микробной обсемененности поверхностей осуществлялась в соответствии с Ме­тодические указания по санитарно-бактериологическому контролю на предприятиях общественного питания и торговли пищевыми продуктами от 31.12.82 №  2657. Смывы брались до обработки и через 30 мин после обработки пространства исследуемыми препаратами с 10 различных участков поверхностей помещения на высоте 40 и 150 см от пола. Чашки инкубировались при 37 °С. Предварительный подсчет выросших колоний производился через 48 ч, окончательный – через 72 ч ин­кубации.

Оценка фунгицидного действия термовозгонных шашек «Тамбей» и «Вимал» проводилась в модельном опыте – затравочной камере объемом 0,1 м3, в концентрациях препаратов 1,0 и 0,02 мг/л (в пересчете на йод) соответственно, время экспозиции – 120 мин. Изучение фунгицидного действия термовозгонной шашки «Тамбей» проводили с использованием 7-суточных культур плесневых грибов Aspergillus fumigatus, Penicillium cyclopium и Mucor spp., взятых со стен помещения для содержания телят учебного хозяйства «Липовая гора» Пермской государственной сельскохозяйственной академии. Оценка фунгицидного действия термовозгонной шашки «Вимал» проводилась по аналогичной модели. В эксперименте использовали 7-суточные культуры плесневых грибов Aspergillus fumigatus, Penicillium cyclopium и Candida albicans. Дрожжевые грибы вида Candida albicans получены в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России, в исследованиях использованы 2-суточные культуры.

Определение родовой и видовой принадлежности плесневых грибов проведено методом микроскопирования путем изучения морфологических признаков с использованием определителя [10].

В качестве питательных сред использовали селективные среды Ча­пека – Докса, Сабуро. Суспензию спор грибов готовили по ГОСТ 9.048-89. Концентрацию спор грибов подсчитывали с помощью с счетной камеры Горяева под микроскопом.

Тест-объектами служили модельные поверхности из дерева, железа и кафеля. На модельные поверхности наносили взвесь тест-грибов из расчета 0,5 мл 2 млрд взвеси жизнеспособных спор плесневых грибов на 100 см2. Для имитации загрязнения использовали 40% инактивированную сыворотку (полученную из крови здоровых кроликов). После равномерного распределения спор культур по поверхности стеклянным шпателем их подсушивали, затем поверхности помещали в герметичный бокс объемом 0,1 м3.

После обработки с тест-по­верхностей брали смывы марлевыми стерильными салфетками, смоченными в растворе, тщательно протирали контаминированную часть каждого предмета, затем салфетки помещали в пробирки с 10 мл ­универсального нейтрализатора (твин-80,0 – 3,0% + сапонин – 3% + гистидин 0,1% + цистеин – 0,1%) и бусами. Время отмыва 10 минут при постоянном встряхивании. Отмывную жидкость из каждой пробирки высевали на две чашки Петри по 0,1 мл на питательные среды Чапека – Докса, Сабуро. Контрольные контаминированные поверхности обрабатывали также водопроводной стерильной водой. Посевы помещали в термостат при температуре 25 ± 1°С. Через 3–5 суток в зависимости от вида микроорганизма подсчитывали количество выросших колоний, затем рассчитывали плотность контаминации на 100 см2 поверхности и процент обеззараживания, принимая количество колоний, снятых с контрольных поверхностей, за 100%.

Статистическая обработка полученных данных осуществлялась с использованием программ GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, Inc., USA) и Statistica 5.0 (StatSoft Inc., Tulsa, OK). Для оценки статистической значимости различий применялся t-критерий для множественных сравнений. Различия считались статистически значимыми при р ≤ 0,05.

Результаты исследований

Исследование противомикробного действия термовозгонных шашек с йодом и пихтовым маслом проводилось в лабораторных условиях (в затравочной камере) и помещениях для содержания крупного рогатого скота учебного хозяйства «Липовая гора» Пермской государственной сельскохозяйственной академии (г. Пермь) и фермы ООО Агрофирма «Труд» (с. Троельга, Пермский край). Дезинфицирующие свойства исследуемых препаратов оценивали по общей микробной обсемененности воздушной среды и поверхностей помещений до и после обработки соответствующими препаратами.

После обработки стандартной затравочной камеры (объем 0,26 м3) исследуемыми препаратами в течение 30 минут обсемененность воздуха заметно снижалась. Препарат «Тамбей» оказывал дозозависимый эффект и в концентрации 2,0 мг/л вызывал статистически значимое снижение количества КОЕ в два раза. Аналогичное двукратное снижение обсемененности воздуха наблюдалось после обработки препаратом «Вимал» в концентрации 0,02 мг/л в пересчете на йод.

При оценке общей микробной обсемененности воздуха коровника при однократной обработке в течение 30 мин ни один препарат не проявил активности, в то время как при более продолжительной (2 ч) экспозиции препарат «Тамбей» (1,0 мг/л) вызывал статистически значимое снижение общего микробного числа на 15%. Препарат «Вимал» при времени экспозиции 2 ч не тестировался.

Обработка помещений фермы в присутствии животных различных возрастов препаратом «Вимал» из расчета 0,02 мг/л в пересчете на йод двукратно с интервалом в 24 ч приводила к снижению количества КОЕ в воздухе в среднем в 2,5 раза (до обработки – 191 КОЕ/10 л, после – 78 КОЕ/10 л).

Исследование общей микробной обсемененности стен помещений для содержания сельскохозяйственных животных в аналогичных условиях обработки препаратом «Вимал» в концентрации 0,02 мг/л в пересчете на йод продемонстрировало снижение количества КОЕ в смывах, взятых на высоте 40 см от пола, в 6,1, а на высоте 150 см – в 8,7 раз. Препарат «Тамбей» в концентрации 1,0 мг/л при однократной обработке и времени экспозиции 30 мин в смывах, взятых на аналогичной высоте, общую микробную обсемененность стен помещения не снизил. Результаты изучения фунгицидного действия препарата «Тамбей» представлены в таблице 1.

Воздействие препарата после 120-минутной экспозиции привело к обеззараживанию поверхностей из кафеля и железа, контаминированных спорами плесневых грибов: Aspergillus fumigates и Penicillium cyclopium – на 47,7; 47,2 и 50,3; 49,4% соответственно; поверхности из дерева были обеззаражены на 35,3 и 34,0%.

Плесневые грибы рода Mucor spp. оказались более устойчивые к воздействию термо­возгонной шашки «Тамбей» на всех видах поверхностей. Процент обеззараживания составил от 11,82 до 19,88%.

При изучении фунгицидного действия препарата «Вимал» установлено 100%-ное обеззараживание поверхностей из кафеля при контаминации плесневыми грибами Aspergillus fumigatus, Penicillium cyclopium и дрожжевыми грибами Candida albicans. Поверхность из железа обеззаражена на 100% от грибов Penicillium cyclopium и Candida albicans и на 99,99% от Aspergillus fumigates. Поверхности из дерева, инфицированные грибами Penicillium cyclopium и Candida albicans, были обеззаражены на 99,99 и 100% соответственно, а поверхности, контаминированные Aspergillus fumigatus, – на 99,92%.

Выводы

В модельных опытах, проведенных в затравочной камере, установлено, что препараты «Тамбей» и «Вимал» обладают антимикробной активностью, поскольку после их применение наблюдалось снижение общей микробной обсемененности воздуха. Уменьшение микробной контаминации пространства помещения после применения исследуемых термовозгонных шашек продемонстрировано также в реальных условиях содержания крупного рогатого скота. Эффективность дезинфекции помещений для содержания животных зависела от режима обработки (доз препаратов и времени обработки), а также от активного вещества, входящего в состав шашки. Снижение количества КОЕ, присутствующих в воздухе, наблюдалось как при воздействии препарата «Вимал», так и препарата «Тамбей», причем их действие усиливалось с увеличением времени обработки. При этом применение препарата «Вимал» приводило к значительному снижению общей обсемененности поверхностей помещений в отличие от препарата «Тамбей», который такого действия не оказывал. Кроме того, снижение количества КОЕ после обработки помещения препаратом «Вимал» в смывах, взятых с высоты 150 см, было выше, чем в смывах с высоты 40 см. Можно предположить, что воздействие препарата «Вимал» на микробную обсемененность поверхностей помещений связано с тем, что входящий в его состав молекулярный йод имеет большую массу, при возгонке не достигается равномерное распределение его в воздухе помещения, йод оседает на поверхностях, где реализуется его антимикробное действие. Пихтовое масло, входящее в состав препарата «Тамбей», при возгонке более равномерно распространяется по всему объему помещения, с чем возможно связано его бактерицидный действие на микрофлору воздуха коровника.

Препарат «Тамбей» обладает менее выраженным фунгицидным действием по сравнению с препаратом «Вимал», который подавляет рост патогенных грибов в интервале 99,92–100%.

Таким образом, проведенные исследования позволят выбрать необходимую тактику лечения и профилактики различных заболеваний при использовании этих двух препаратов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Боченин Ю. И., Закомырдин А. А. Аэрозоли в профилактике инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных // Ветеринарный консультант. – 2004. – № 23-24. – С. 10–18.
2. Gerald Mcdonnell and A. Denver Russell. Antiseptics and Disinfectants: Activity, Action, and Resistance // Clinical microbiology reviews. – 1999. – Vol. 12, No. 1. – Pp. ­147–179.
3. Банников В. Н. Применение дез­инфектанта вироцида в птицеводстве // Ветеринария. – 2007. – № 3. – С. 18–19.
4. Щедров И. Н., Николаенко В. П., Ляпохов Г. В. Эффективность бактерицида при обеззараживании объектов ветнадзора // Ветеринария. – 2005. – № 8. – С. 43–45.
5. Бурова О. А., Блохин А. А., Исаев В. В. Применение ГААС-45 в системе противоэпизоотических мероприятий при микстинфекциях новорожденных телят // Сб. трудов VIII междунар. науч.-практ. конференции «Аграрная наука – сельскому хозяйству», Барнаул, 06 февраля 2013–07 февраля 2012. – 2013. – С. 361–366.
6. Карташова А. А. Профилактическая дезинфекция свиноводческих помещений дымовой шашкой ГААС // Сельское хозяйство проблемы и перспективы : сб. науч. трудов. Т. 25. – Гродно, 2014. –  С. 104–111.
7. Фокин А. И. Аэрозольная дезинфекция с препаратом «Диксам» // Птицеводство. – 2010. – № 6. – С. 38–39.
8. Солодников С. Ю., Солова И. В. Термовозгонные шашки // Ве­теринария. – 2006. – № 5. – С. ­15–18.
9. Омелянский В. Л. Практическое руководство по микробиологии / под общ. ред. проф. Б. Л. Исаченко ; 2-е изд., перераб. и доп. – М.-Л. : ­Изд-во АН СССР, 1940. – 432 c.
10. Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов. – М. : Мир, 2001. – 486 с.

Метки: Ветеринария и зоотехния

• Назад
• Вперед