ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЛЕЙКОГРАММЫ КРОВИ НУТРИЙ В РАЗНОМ ВОЗРАСТЕ

Категория: Ветеринария и зоотехния.

Реферат. Посредством дифференциального подсчета изучено соотношение разных видов лейкоцитов крови 50 клинически здоровых самок и самцов нутрий разных половозрастных групп. Для определения достоверно значимых различий в соотношении нейтрофилов и лимфоцитов крови нутрий были рассчитаны индекс Гаркави и нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент. Установлено, что процентное соотношение нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов, а также индекс Гаркави и нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент крови самок и самцов нутрий с возрастом подвержены выраженным колебаниям волнообразного характера. Наличие базофилов в крови нутрий регистрируется только в возрасте семи с половиной месяцев, при этом их процентное содержание у самок оказалось достоверно выше, чем у самцов. Процентное содержание эозинофилов в крови самок и самцов нутрий между всеми исследуемыми возрастными группами, а также между самками и самцами одного возраста достоверно не изменяется. С первых суток и до двух месяцев жизни у самок и самцов нутрий регистрируется «физиологический перекрест» лейкоцитарного профиля с нейтрофильного на лимфоцитарный, который сохраняется до двенадцатимесячного возраста. В период относительного снижения нейтрофилов в крови самок и самцов нутрий (четыре с половиной и семь с половиной месяцев) наблюдается повышение содержания моноцитов. Достоверно значимая периодичность половозрастных изменений в соотношении некоторых видов лейкоцитов нутрий указывает на необходимость учета пола и возраста при интерпретации лейкограммы крови этого вида животных.

Ключевые слова: нутрии, кровь, лейкограмма, лейкоциты, постнатальный онтогенез.

Лейкоциты – это группа клеток крови, разнообразных по строению и выполняемым функциям, основной задачей которых является защита организма от чужеродных агентов. Количество, а также соотношение разных видов лейкоцитов – лейкограмма – является базовым параметром клинической лабораторной диагностики животных, который обеспечивает объективную оценку тяжести, специфичности и направленности различных заболеваний, а также состояние иммунитета в целом [1, 2].

Иммунная система в постнатальном онтогенезе животного организма подвержена многочисленному спектру изменений и перестроек [1, 3, 4, 5], что в значительной мере ­отражается на течении патологического процесса в том или ином возрасте [6, 7]. Количество и соотношение иммуноцитов крови во многом определяются половой принадлежностью и воздействием половых гор­монов [8].

Нутрии входят в список основных объектов звероводства России и являются источником диетического мяса и ценного меха [9, 10, 11]. Сведения о лейкоцитарном составе крови нутрий отражены в работах Л. П. Мироновой [12], О. Ю. Чер­ных [13], P. Jelínek, M. Glásrová [14], P. E. Martino, [et al.] [15] и др., но не раскрывают при этом половозрастной аспект. В связи с этим цель исследования – изучить динамику показателей лейкоцитарной формулы крови самок и самцов нутрий в различные периоды постнатального онтогенеза.

Материал и методы

Объектом исследования служили 50 клинически здоровых самок и самцов нутрий клеточного содержания стандартного окраса в возрасте 1 сутки, 2 месяца, 4,5; 7,5; и 12 месяцев (по 5 самцов и 5 самок в каждой возрастной группе).

Для изучения гематологических показателей нутрий отбирали образцы крови из хвостовой артерии в вакуумные пробирки фирмы AQUISEL (Испания) с антикоагулянтом К3Е/ЭДТА объемом 0,5 мл.

Исследование количества лейкоцитов проводили на автоматизированном гематологическом анализаторе МЕК-6400J/K фирмы Nihon Kohden (Япония).

Дифференциальный подсчет лейкоцитов (лейкограмма) проводили визуальной микроскопической оценкой сухих мазков крови, фиксированных в абсолютном метиленовом спирте и окрашенных азур-эозиновой смесью по методу Романовского – Гимза. При подсчете лейкоцитов использовали четырехпольный метод Шиллинга.

Индекс Гаркави (ИГ) рассчитывали по следующей формуле.

Нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент (НЛК) рассчитывали по формуле НЛК, где мц – миелоциты, %, ммц – метамиелоциты, %, п – палочкоядерные нейтрофилы, %, с – сегментоядерные нейтрофилы, %, лимф – лимфоциты,%.

Числовые данные обрабатывали с помощью однофакторного дисперсионного анализа и множественного сравнения Ньюмена – Кейлса в программе Primer of Biostatistics 4.03 для Windows. Достоверными считали различия при р < 0,05.

Результаты и обсуждение

Анализ количества лейкоцитов в крови нутрий показал (табл. 1), что значения данного показателя достоверно различаются между исследуемыми возрастными группами только с двух до четырех с половиной месячного возраста, при этом количество лейкоцитов в крови самок нутрий достоверно возрастает в 2,00, а самцов – в 1,98 раза. Между самками и самцами нутрий одного возраста достоверных различий по количеству лейкоцитов в крови выявлено не было.

Низкие значения количества лейкоцитов в крови самок и самцов нутрий в двухмесячном возрасте, на наш взгляд, могут быть обусловлены дефицитом компонентов, необходимых для лейкопоэза, поскольку в данный возрастной период у нутрий происходит прекращение питания молоком матери и, следовательно, перестройка экзогенного питания организма. В последующие возрастные периоды количество лейкоцитов остается стабильным, достигая своих максимальных значений к двенадцати месяцам жизни, что, по нашему мнению, свидетельствует о становлении иммунитета.

При сравнении процентного соотношения различных видов лейкоцитов между исследуемыми возрастными группами нутрий, а также между самками и самцами нутрий одного возраста выявлен ряд особенностей и закономерностей (табл. 2).

Таблица 2 – Лейкоцитарная формула крови нутрий разных половозрастных групп

Примечание: статистическая значимость различий с более ранней возрастной группой обозначена *; у самок по сравнению с самцами одной возрастной группы – #.

Базофилы – наименее распространенные клетки крови, участвующие в реакциях гиперчувствительности, являются источником гистамина и цитокинов, они участвуют в патогенезе аллергических и воспалительных реакций [16, 17].

В результате исследований установлено, что наличие базофилов в крови нутрий было зарегистрировано только в возрасте семи с половиной месяцев, при этом их процентное содержание у самок оказалось достоверно выше, чем у самцов в 3,00 раза. Причина высокого процентного содержания базофилов у самок нутрий в семи с половиной месячном возрасте, вероятно, обусловлена повышенным уровнем эстрогенов в организме вследствие протекания полового цикла.

Эозинофилы являются многофункциональными лейкоцитами, участвующими в аллергических реакциях, противопаразитарном иммунитете, поглощении и высвобождении медиаторов воспаления, модуляции адаптивного и врожденного иммунитета, а также обладают способностью к фагоцитозу [2, 18].

Процентное содержание эозинофилов в крови самок и самцов нутрий между всеми исследуемыми возрастами, а также между особями разного пола одного возраста достоверно не изменяется, что свидетельствует о стабильно низкой аллергической готовности организма в постнатальном онтогенезе этого вида животных.

Нейтрофилы играют роль в патогенезе широкого спектра заболеваний (инфекционные, аутоиммунные, онкологические, паразитарные и др.) и являются клетками острого воспалительного ответа, эффекторные молекулы нейтрофилов включает широкий спектр цитокинов и внеклеточные «ловушки», кроме того, они участвуют в активации и регуляции врожденного и адаптивного иммунитета [19, 20].

При анализе процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов в крови нутрий установлено, что с первых суток жизни и до двухмесячного возраста значение данного показателя достоверно снижается у самок нутрий в 3,27 раза, а у самцов – в 3,6. Между последующими возрастными группами, а также между самками и самцами одного возраста достоверных различий по процентному содержанию палочкоядерных нейтрофилов не выявлено.

Повышенное содержание палочкоядерных нейтрофилов после рождения является закономерной особенностью животного организма и служит следствием функциональной неполноценности миелопоэтической системы [1].

Процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в крови самок нутрий с рождения и до двух месяцев жизни достоверно уменьшается на 42,51, а у самцов – на 70,39%. К четырем с половиной месяцам жизни значение этого показателя достоверно снижается у самок нутрий на 99,04, а у самцов – на 45,53% по сравнению с предыдущим возрастом. Между четырьмя с половиной и семью с половиной месячным возрастом процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в крови самок и самцов нутрий достоверно не различается. В двенадцатимесячном возрасте значение данного показателя достоверно возрастает только у самцов нутрий на 46,15%, по сравнению с предыдущим возрастом.

Между самками и самцами нутрий одного возраста достоверные различия по процентному содержанию сегментоядерных нейтрофилов в крови выявлены только в возрасте двенадцати месяцев жизни, при этом у самок значение данного показателя меньше, чем у самцов на 37,50%.

Высокое процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в первые сутки жизни самок и самцов нутрий, на наш взгляд, обусловлено активацией неспецифического иммунитета и, следовательно, высокой потребностью в интенсивной защите новорожденного организма от чужеродных агентов.

Лимфоциты осуществляют эффекторные реакции клеточного и гуморального иммунитета, обеспечивая формирование реакций адаптивного иммунитета, а также являются важными эффекторами врожденного иммунитета [21].

При анализе процентного содержания лимфоцитов в крови нутрий установлено, что с рождения до двухмесячного возраста значение данного показателя у самок нутрий достоверно возрастает на 76,81%, а у самцов на 138,14% (в 2,38 раза). С двух до четырех с половиной месяцев жизни процентное содержание лимфоцитов в крови нутрий достоверно возрастает только у самок – на 37,30%. В возрасте семи с половиной месяцев жизни у самок и самцов нутрий значение этого показателя достоверно не изменяется, по сравнению с предыдущим возрастом. К возрасту двенадцати месяцев жизни процентное содержание лимфоцитов в крови нутрий достоверно уменьшается только у самцов – на 20,00% по сравнению с особями семи с половиной месячного возраста.

Между самками и самцами нутрий одной возрастной группы достоверные различия по процентному содержанию лимфоцитов в крови выявлены только в возрасте двух месяцев (у самок меньше, чем у самцов, – на 15,16%) и двенадцати месяцев (у самок больше, чем у самцов, – на 23,20%).

Соотношение нейтрофилов к лимфоцитам с рождения до двух месяцев жизни наглядно демонстрирует «физиологический перекрест» лейкоцитарного профиля самок и самцов нутрий с нейтрофильного на лимфоцитарный, что обусловлено формированием системы специфического иммунитета и является закономерной возрастной особенностью лейкоцитарного состава крови млекопитающих [1].

Моноциты – клетки иммунной системы, способные к хемотаксису и обладающие противовирусной, противомикробной, противогрибковой, противопаразитарной, противоопухолевой активностью посредством продукции цитокинов и фагоцитарной функции, а также являющиеся важным звеном регуляции адаптивного иммунитета [22, 23].

Процентное содержание моноцитов в крови самок и самцов нутрий с рождения и до двухмесячного возраста достоверно не изменяется. В возрасте четырех с половиной месяцев значение этого показателя достоверно возрастает у самок нутрий в 2,22, а у самцов – в 1,90, по сравнению с предыдущей возрастной группой. С четырех с половиной и до семи с половиной месяцев жизни процентное содержание моноцитов в крови самок и самцов нутрий достоверно не изменяется. К возрасту двенадцати месяцев жизни значение данного показателя достоверно снижается у самок нутрий в 2,69, а у самцов – в 1,79 ра­за по сравнению с особями семи с половиной месячного возраста.

Между самками и самцами нутрий одного возраста достоверных различий по процентному содержанию моноцитов в крови выявлено не было.

В период относительного снижения нейтрофилов в крови самок и самцов нутрий (четыре с половиной и семь с половиной месяцев) наблюдается повышение содержания моноцитов, что является компенсаторной реакцией организма в ответ на снижение общего количества гранулоцитов, что, по нашему мнению, является следствием развития и физиологической перестройки миелопоэтической системы. Данная закономерность может быть причиной полового и физиологического созревания самок и самцов нутрий, происходящее, как указывает Л.П. Миронова (2005) [12], в период с четырех до восьми месяцев жизни.

Наиболее частые и выраженные изменения лейкоцитарного состава крови происходят в основном за счет нейтрофилов и лимфоцитов, а изменения в их соотношении могут отражать развитие стресс-реакции организма [24]. Для определения достоверно значимых различий в соотношении нейтрофилов и лимфоцитов крови нутрий нами были рассчитаны индекс Гаркави и нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент.

При анализе результатов расчета индекса Гаркави у нутрий выявлено (табл. 3), что с рождения до двух месяцев жизни значение данного показателя достоверно возрастает: у самок нутрий – в 2,52, а у самцов – в 3,85 раза. С двухмесячного и до четырех с половиной месячного возраста индекс Гаркави достоверно увеличивается: у самок нутрий – в 2,67, а у самцов – в 1,67 раза. С четырех с половиной и до семи с половиной месячного возраста значение данного показателя достоверно снижается только у самок нутрий – на 40,44%. К возрасту двенадцати месяцев индекс Гаркави достоверно уменьшается только у самцов нутрий – на 80,00% – по сравнению с предыдущим возрастом.

Таблица 3 – Индекс Гаркави нутрий разных половозрастных групп

Примечание: статистическая значимость различий с более ранней возрастной группой обозначена *; у самок по сравнению с самцами одной возрастной группы – #.

Между самками и самцами нутрий одного возраста достоверные различия по индексу Гаркави выявлены только в возрасте четырех с половиной месяцев (у самок больше, чем у самцов, на 22,35%) и в возрасте двенадцати месяцев жизни (у самок больше, чем у самцов, на 74,17%).

При сопоставлении результатов расчета нейтрофильно-лимфоцитарного коэффициента у нутрий установлено (табл. 4), что с первых суток жизни до двухмесячного возраста значение этого показателя достоверно снижается у самок нутрий в 2,82, а у самцов – в 4,84 раза. Между последующими изученными возрастными периодами нутрий, а также между особями разного пола одного возраста достоверных различий по нейтрофильно-лимфоцитарному коэффициенту выявлено не было.

Таблица 4 – Нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент нутрий разных половозрастных групп

Примечание: статистическая значимость различий с более ранней возрастной группой обозначена *; у самок по сравнению с самцами одной возрастной группы – #.

Таким образом, достоверно значимая периодичность половозрастных изменений в соотношении некоторых видов лейкоцитов нутрий указывает на необходимость учета пола и возраста при интерпретации лейкограммы крови этого вида животных.

Выводы

Процентное соотношение нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов, а также индекс Гаркави и нейтрофильно-лимфоцитарный коэффициент крови самок и самцов нутрий с возрастом подвержены выраженным колебаниям волнообразного характера.

Наличие базофилов в крови нутрий регистрируется только в возрасте семи с половиной месяцев, при этом их процентное содержание у самок достоверно выше, чем у самцов.

Процентное содержание эозинофилов в крови самок и самцов нутрий между всеми исследуемыми возрастными группами, а также между самками и самцами одного возраста достоверно не изменяется.

С первых суток и до двух месяцев жизни у самок и самцов нутрий регистрируется «физиологический перекрест» лейкоцитарного профиля с нейтрофильного на лимфоцитарный, который сохраняется до двенадцатимесячного возраста.

ЛИТЕРАТУРА

1. Любин Н. А., Конова Л. Б. Методические рекомендации к оп­ределению и выведению гемограммы у сельскохозяйственных и лабораторных животных при патологиях. – Ульяновск : Изд-во ГСХА, 2005. – 113 с.
2. Клиническая интерпретация лабораторных исследований / под ред. А. Б. Белевитина, С. Г. Щербака. – СПб. : ЭЛБИ-СПб., 2006. – 384 с.
3. Кривоногова А. С., Исаева А. Г. Иммуногематологические пока­затели молодняка свиней // Ве­теринария Кубани. – 2015. – № 6. – С. 26–27.
4. Кижина А. Г., Узенбаева Л. Б., Илюха В. А. Морфофункциональ­ные особенности ­лейкоцитов пе­риферической крови ­норок сап­фирового окраса в ­раннем пост­натальном онтогенезе / Ученые записки Орловского государствен­ного университета. Серия: Естест­венные, технические и медицинские науки. – 2014. – Т. 1, № 7. – ­С. ­244–245.
5. Самбуров Н. В. Популяции лимфоцитов в крови черно-пестрых ремонтных телок // Вестник Кур­ской государственной сельско­хозяйственной академии. – 2010. – Т. 1, № 1. – С. 72–75.
6. Онтогенетические особенности изменения фагоцитарной активности лейкоцитов при острой боли. / Овсянников В. Г., Бойченко А. Е., Николаев В. Е. [ и др.]. – 2012. – № 2. – С. 67.
7. Collins B. H., Holzknecht Z. E., Lynn K. A. [et al.]. Association of age-dependent liver injury and fibrosis with immune cell populations // Liver international // Оfficial journal of the International аssociation for the Study of the Liver. – 2013. – Vol. 33, No. 8. – Pp. 1175–1186.
8. Bhatia A., Sekhon H. K., Kaur G. Sex hormones and immune dimorphism // The Scientific World Journal. – Published online. – 2014.
9. Шевченко А. А., Шевченко Л. В. Нутрии. Содержание и разведение ; 2-е изд., испр. – М. : Аквариум-Принт, 2009. – 160 с.
10. Василенко В. Н., Миронова Л. П., Миронова А. А. Нутриеводство: учеб. пособие. – Ростов н/Д. : Ростиздат, 2003. – 304 с.
11. Кладовщиков В. Ф., Александ­ров В. Н. Стимулировать развитие нутриеводства и кролиководства // Кролиководство и звероводство. – 2002. – № 3. – С. 23–24.
12. Миронова Л. П. Морфо­функ­циональные основы интенси­фикации воспроизводства нутрий: дис. … д-ра вет. наук. – п. Пер­сиановский, 2005. – 321 с.
13. Черных О. Ю. Гематологический статус нутрий, привитых ассоциированной вакциной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции // Фундаментальные исследования. – 2008. – № 4. – С. ­72–73.
14. Jelínek P., Glásrová M. The white blood cell picture in male nutria in the postnatal period // Veterinární medicína  – 1982. – Vol. 27, No. 6. – Pp. 337–348.
15. Martino P. E., Aráuz S. M., Anselmino F. [et al.]. Hematology and serum biochemistry of free-ranging nutria (Myocastor coypus) // Journal of Zoo and Wildlife Medicine. – 2012. – Vol. 43, No. 2.  – Pp. 240–247.
16. Basophils and allergic inflamm­ation / Siracusa M. C., Kim B. S., Spergel J. M. [et al.] // Journal of Allergy and Clinical Immunology. – 2013. – Vol. 132, No. 4. – Pp. 789–801.
17. Schroeder J. T. Basophils beyond effector cells of allergic inflammation // Advances in Immunology. – 2009. – Vol. 101. – Pp. 23–61.
18. Rothenberg M. E., Hogan S. P. The eosinophil // Annual Review of Immunology. – 2006. – Vol. 24. – Pp. 147–174.
19. Neutrophils in the activation and regulation of innate and adap­tive immunity / A. Mantovani, M. A. Cassatella, C. Costantini [et al.] / Nature Reviews Immunology. – 2011. – Vol. 11, No. 8. – Pp. 519–531.
20. Segal A. W. How neutrophils kill microbes // Annual Review of Immunology. – 2005. – Vol. 23. – Pp. 197–223.
21. Манько В. М., Девришов Д. А. Ветеринарная иммунология. Фунда­мен­тальные основы. – М. : Агровет, 2011. – 752 с.
22. Monocyte-mediated defense against microbial pathogens / N. V. Serbina, T. Jia, T. M. Hohl [et al.] // Annual Review of Immunology. – 2008. – Vol. 26. – Pp. 421–452.
23. F. Geissmann, M. G. Manz, S. Jung [et al.]. Development of monocytes, macrophages and dendritic cells // Science. – 2010. – Vol. 327, No. 5966. – Pp. 656–661.
24. Гаркави Л. Х., Квакина Е. Б., Уколова М. А. Адаптационные реакции и резистентность организма ; 3-е изд., доп. – Ростов н/Д. 1990. – 224 с.

Метки: Ветеринария и зоотехния

• Назад
• Вперед